实验教学

 一、实验目的：

1、掌握细菌单染色和革兰氏染色的基本方法。

2、掌握油镜的使用方法。

3、掌握无菌操作的基本方法。

二、实验原理：

1、细菌单染色和革兰氏染色的原理。

2、油镜的使用原理。

三、实验菌种：

B1（枯草芽孢杆菌），B5（金黄色葡萄球菌），B7（大肠杆菌），螺旋菌（口腔）

四、实验过程：

1、细菌的单染色

1.1  要求：分别制作B1和自身口腔牙垢螺旋菌涂片，染色并观察。

1.2  过程：涂片 → 干燥 → 固定 → 结晶紫染色（2分钟）→ 水洗 →干燥 → 镜检。

2、细菌的革兰氏染色

2.1  要求：制作B5和B7的混合涂片，染色并观察（B7比B5多涂一些）。

2.2  过程：涂片，干燥，固定 → 结晶紫染色（2分钟）→ 水洗 → 碘液（1分钟）→ 水洗 → 酒精（15秒）→ 立刻水洗 → 番红（2分钟）→ 水洗 → 干燥 → 镜检。

3、细菌的群体形态观察（菌落的大小、色泽、透明度、形状、边缘、突起程度）。

五、作业：

1、准确画出所看到的细菌形态、排列方式及染色结果。

2、你认为那些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中的关键环节是什么？P30  2(1)

菌株：每个菌株8支试管，共24个试管，一个斜面8 ml，共要200 ml （个班）