实验教学

一、 实验目的：

观察盐酸普萘洛尔对氯仿诱发小鼠心室纤颤（室颤）的预防作用。

二、 实验原理：

1、心室纤颤，全称心室纤维性颤动，简称室颤，是指患者的心肌突然丧失了整体的协调性，呈不规则的收缩，因而不能将血液泵出的临床危险状态。室颤分为原发性室颤（Primary ventricular fibrillation）和继发性室颤（Secondary ventricular fibrillation ）两种。前者指室颤发生之前无心力衰竭、低血压或休克等循环障碍的情况，患者仅仅是在心脏异常的基础上发生了一时的心电功能性障碍，也就是说多数患者的心脏虽然有较广泛的累及2支以上的冠脉硬化狭窄，但发病时并未出现严重的组织结构的直观改变，室颤的发生是由于局部心肌缺血导致的可逆性心电活动紊乱的结果，临床上该型室颤导致的猝死占心脏性猝死的80%～90%。后者指继发于严重的各种疾病尤其是终末期心脏病的患者，或患者的心脏发生了结构学、形态学、组织学上的严重病变，如大面积心肌梗死、严重的心肌炎和心肌病、心室破裂、心脏压塞、心内机械性梗阻和主动脉夹层等。现场抢救原发性室颤患者是院前急救最有意义且又最重要的医疗行动，如果抢救成功，患者很少留下后遗症。而继发性室颤患者的预后较差，即使复苏成功，住院病死率仍为50%～70%。

心室扑动（Ventricular flutter）简称室扑，是介于室速和室颤之间的一种过渡心律，室扑发生后患者的心肌呈无力状态的快速收缩，使其心输出量明显下降，甚至为零。室扑的持续时间很短，一般在数分钟内就会转为室颤，少数患者转为室速。室扑常常是室颤的先兆，是仅次于室颤的最严重的心律失常。室扑时心肌基本丧失收缩力，因此机体的血流基本处于停顿的状态，其临床意义接近于室颤。因此室扑的现场抢救与室颤相同。心室颤动是临床上最危险的心律失常，是心脏停搏的常见类型之一。由于室颤时患者的心脏丧失了整体的收缩-舒张功能，因而无法泵血，此时其心输出量为零，血液循环中断，从而使患者即刻处于临床死亡状态，必须在4 min内得到正确抢救，否则无生还希望

2、导致室颤的最常见原因是心电不稳定，可能与下述因素有关：①急性冠脉综合征导致的心脏局部供血障碍：血栓形成和冠脉痉挛；②缺氧导致的一系列病理生理改变：如交感神经兴奋、无氧代谢造成乳酸等大量代谢产物增加及心肌细胞代谢异常如细胞内钙离子、钠离子超负荷蓄积及钾离子丢失等；③再灌注产生的超氧自由基大量增加，细胞膜离子泵活性改变和局部电生理紊乱；④缺血心肌组织和非缺血心肌组织之间的明显的代谢差异；⑤心肌的基础状态：以往有慢性心肌损伤、心肌肥厚、低血钾等易感状态在心肌缺血的触发下则更易于发生致命性心律失常。

3、心室颤动的药物治疗

① 肾上腺素

肾上腺素(adrenaline，epinephrine，AD)同时具有α和β-肾上腺素能样作用，具有增加全身血管阻力；增加动脉收缩和舒张压；正性肌力、正性节律、正性传导；增加冠状动脉和脑部循环血流的作用。另外β-肾上腺素能样作用还能兴奋高位和低位起搏点，室颤时能使细颤转为粗颤，有利于复律。肾上腺素是CPR的首选药物，可应用于对最初电击治疗无效的心室颤动及无脉性室速、心脏停搏或无脉性电生理活动等情况。但该药的β-肾上腺素能样作用是否有利于复苏仍有争议，因其可能增加心肌氧耗和减少心内膜下心肌灌注。

②血管加压素

血管加压素(vasopressin)又称抗利尿激素，是由垂体后叶分泌的内源性血管加压肽,能选择性地收缩非重要脏器组织的阻力血管，而不影响包括心、脑等重要脏器组织的血流。其升高血压的作用主要通过V1和V2两种受体介导的。V1受体主要调节升压作用；V2受体主要调节抗利尿作用。有报道，心肺复苏成功的患者血液中血管加压素的浓度明显高于心肺复苏失败者，这提示复苏成功的患者体内较高浓度的血管加压素可提高器官的灌注率和复苏的成功率。

③β受体阻滞剂

在心肺复苏中，室颤和电击对于机体来说是双重不良应激，会加强激活交感神经，连续除颤2-3次以上，可激发交感神经剧烈激活，产生电除颤抵抗，除颤和常规的抗心律失常药物难以奏效。临床研究发现电击抵抗性室颤患者电除颤多次失败后，静脉给予β受体阻滞剂，患者需要电除颤的次数减少，并且易于除颤成功。在抢救反复发作室颤的患者时，多次电除颤等其它办法无效，特别是在心肌缺血或梗死存在时，静脉应用β受体阻滞剂可以收到意想不到的结果。

④胺碘酮

胺碘酮作用于钠、钾和钙通道，并对α-受体和β-受体有阻滞作用。对于心力衰竭合并室颤患者，胺碘酮可作为首选用药。此时胺碘酮较其他抗心律失常药物作用更强，效果更好，而致心律失常的副作用更小。

4、氯仿诱发小鼠室颤可能与其诱发体内儿茶酚胺含量升高和对心脏的直接作用有关。儿茶酚胺通过β－受体作用于心脏，使心率加快，收缩力增强，传导速度增快，心输出量增加。盐酸普萘洛尔有β受体阻断作用，可阻断儿茶酚胺通过β受体产生的一系列效应，对抗氯仿对心脏的作用。

三、实验材料

小白鼠24只（每组6只）；氯仿5ml；0.01%盐酸普萘洛尔溶液10mL；生理盐水10mL。

四、实验器材

大烧杯，剪刀，大镊子，1ml注射器。

五、实验方法

每组取小鼠4只，称重并编号①②③④。①号小鼠腹腔注射0.01%盐酸普萘洛尔0.2ml/10g，③号小鼠腹腔注射等量的生理盐水作对照。（②④号小鼠20min后按相同方法和剂量给药）。给药30min后两只小鼠同时一起扣入预先放有含0.5ml氯仿棉球的大烧杯内。待小鼠翻倒之后取出小鼠，处死后立即剖胸（剖胸要快），观察心脏跳动情况，判断有无室颤出现。

六、结果整理

1、各组实验结果填入表1，分析盐酸普萘洛尔对心室纤颤的预防作用。

2、用χ2检验判定给药组与对照组纤颤发生率有否显著性差异（班长统计全班结果，记入表2）。

表1

表2 

χ2= n (ad - bc) 2 / [(a+b)(c+d)(a+c)(b+d)]　其中n=a+b+c+d为样本容量

χ2的值越大，说明“X与Y有关系”成立的可能性越大。

根据χ2值查阅卡方分布表，找到X与Y有关系”成立的概率。

七、注意事项

1、小鼠的室颤发生率与体重有关，25-35室颤率较高。此外，与环境温度也有关系，25°到35°是室颤发生率较高，实验室应记录室内温度。

2、小鼠呼吸停止后，不可在烧杯内停留时间过久。

3、若剖胸直接观察心脏活动，切记不要将心脏剪破。