实验教学

院系：生命科学学院

教师：王翠玲

课程名称：《中药化学实验指导》

课程性质：专业课，必修

实验学时： 36学时

考核方式：实验预习30%、实验操作40%、实验报告30%。

实验教材：自编教材：王翠玲等， 《中药化学实验指导》

一、 实验教学目的或要求

该课程是中药学专业本科生教学的必修课程，实验的基本内容是根据各类化合物的主要理化性质，选择合适的提取、分离、精制的方法，将原药材中的有效成分提出，并选用适当的鉴定方法，对提取物作出鉴别。实验的目的是培养学生的基本操作技能，并通过实验现象加深对理论学习中一些问题的理解和思考。教学大纲要求实验学时36学时。实验类别为操作性实验、验证性实验和自主设计实验。提取分离实验个数为4个。

二、 教学内容

第一部分  中药化学实验基础知识及技术

实验一  薄层板的制备、适度测定及应用

实验二  薄层层析展开剂的选择

第二部分 实验部分

实验一   苦杏仁中苦杏仁苷的提取和结构鉴定

实验二    大黄中总蒽醌的提取与分离

实验三    汉防己生物碱的提取、分离和鉴定

第三部分 自主设计实验

实验一 槐米中芦丁的提取、精制和检识

实验二 从穿山龙中提取薯蓣皂苷元

实验三 白藜芦醇的提取和鉴别

第一部分  中药化学实验基础知识及技术

实验一  薄层板的制备、适度测定及应用

【实验目的】讲解

1．掌握薄层板的制备及薄层层析的操作方法

2．了解吸附剂活度测定的原理及方法

【实验内容】讲解、操作

一、各种薄层板的制备

1．不加粘合剂的薄层涂布法：（1）氧化铝薄层；（2）纤维素薄层

（3）聚酰胺薄层

2．加粘合剂薄层的涂布法：（1）硅胶G薄层；（2）硅胶（H）羧甲基纤维钠（CMC-Na）薄层；

3．特殊薄层的制备：（1）酸、碱薄层和pH缓冲薄层；（2）络合薄层

二、吸附剂的活度测定

1．氧化铝活度的测定

2．硅胶活度的测定

三、薄层层析的应用

【学时】 4学时

【主要仪器设备】

薄层板、展缸、毛细管等。

实验二  薄层层析展开剂的选择

【实验目的】讲解

1、掌握薄层层析的操作方法及原理。

2、了解展开剂与吸附剂和被分离物质的三者关系。

【实验内容】讲解、操作

薄层展开

【学时】 4学时

【主要仪器设备】

薄层板、展缸、毛细管等。

第二部分 实验部分

实验一   苦杏仁中苦杏仁苷的提取和结构鉴定

【实验目的】讲解

1、掌握苦杏仁苷的提取、精制的原理及操作。

2、 学习苷类的一般分解方法。

3、学习化学分析和光谱分析相结合确定苦杏仁苷的结构。

【实验内容】讲解、操作

1、 苦杏仁苷的提取和精制：脱脂、提取及精制

2、苦杏仁苷的结构鉴定：显色反应、水解反应、糖的硅胶薄层检查、苦杏仁苷氧化液薄层检查、红外鉴定。

【学时】 8学时

【主要仪器设备及材料】

实验原料：苦杏仁、葡萄糖（标准品），龙胆二糖（标准品），苯甲酸（标准品）。

实验仪器：索氏提取器，圆底烧瓶（500ml，100ml），滤纸，电热套，布氏漏斗，锥形瓶（1000ml），球形冷凝管，电子天平，托盘天平，点滴板，试管，pH试纸，水浴锅，薄层板，研钵。

实验试剂：乙醚（或石油醚），95%乙醇，改良碘化铋钾，硫酸，苦味酸钠，氢氧化钠，苦杏仁酸，羧甲基纤维素钠，正丁醇，醋酸，邻苯二甲酸苯胺，高锰酸钾，氨水，碘蒸汽，KBr（99.99%）。

实验二    大黄中总蒽醌的提取与分离

【实验目的】讲解

1.掌握从大黄中提取总蒽醌原理及方法。

2. 熟悉用硅胶柱层析方法分离混合羟基蒽醌类成分的一般操作技术。

3. 熟悉蒽醌类化合物的鉴定反应。

【实验内容】讲解、操作

1、大黄中总蒽醌的提取。

2、总蒽醌的柱层析及薄层检测。

【学时】 8学时

【主要仪器设备及材料】

实验原料：大黄。

实验试剂：95%乙醇，10%硫酸，乙醚，硅胶（160目），石油醚，乙酸乙酯，苯。

实验仪器：电热套，圆底烧瓶（1000ml，250ml），球形冷凝管，分液漏斗，锥形瓶，玻璃柱，薄层板，旋转蒸发器，铁架台，量筒，红外灯。

实验三    汉防己生物碱的提取、分离和鉴定

【实验目的】讲解

1、掌握总生物碱的提取及脂溶性生物碱和水溶性生物碱、酚性叔胺碱及非酚性叔胺碱、水溶性碱与水溶性杂质的分离、纯化的方法及原理。

2、学习用吸附色谱法分离生物碱的操作技术。

3、掌握生物碱的鉴定方法。

4、学习生物碱衍生物的制备方法。

【实验内容】讲解、操作

1、总生物碱的提取。

2、亲酯性生物碱和亲水性生物碱的分离。

3、汉防己甲素和汉防己乙素的分离：柱色谱分离法；溶剂分离法。

4、季胺型生物碱的分离纯化

5、汉防己碱二碘甲烷盐（汉松肌）的制备

6、鉴定：沉淀法、色谱法

【学时】 8学时

【主要仪器设备及材料】

实验原料：汉防己

实验试剂：95%乙醇，1%盐酸，二氯甲烷，浓氨水，1%氢氧化钠，dragendorff 试剂，丙酮，中性氧化铝，硅胶G，CMC-Na，甲苯，20%盐酸，雷氏铵盐，0.6%硫酸银，10%氯化钡，10%氢氧化钾，碘甲烷，甲醇，乙醇，环己烷，无水硫酸钠，苦味酸试剂，碘-碘化钾试剂，硅钨酸试剂，碘化铋钾试剂。

实验仪器：量筒，烧杯，500ml圆底烧瓶，回流冷凝管，锥形瓶，250ml分液漏斗，蒸发皿，试管。

第三部分 自主设计实验（任选1个）

实验一 从槐米中芦丁的提取、精制和检识

【实验目的】

培养学生查阅资料、自行设计实验的能力，最终目的培养学生创新思维和创新能力。

【实验内容】老师指导、学生自行操作。

指导学生查阅认识黄酮类化合物的结构、性质及来源；

指导学生查阅资料并设计出从槐米中提取、精制及检识芦丁的方法。

引导学生总结：

提取与精制黄酮类化合物提取的原理及方法并要求掌握；

黄酮类化合物的鉴别方法及苷的酸水解方法。

【学时】 8学时

【主要仪器设备及材料】

实验原料：槐米

实验试剂及实验仪器依据学生设计的实验准备。

实验二 从穿山龙中提取薯蓣皂苷元

【实验目的】

培养学生查阅资料、自行设计实验的能力，最终目的培养学生创新思维和创新能力。

【实验内容】老师指导、学生自行设计、操作。

1、指导学生查阅认识甾体皂甙类化合物的结构、性质及来源；

2、指导学生掌握亲脂性中性成分（甾体皂甙元）的提取方法（直接水解法），了解其他提取方法（高压水解，超临界CO2萃取法）。

3、指导学生查阅资料并设计出从穿山龙中提取、精制及检识薯蓣皂苷元的方法。

4、引导学生总结：

1）提取与精制甾体皂甙类化合物的原理及方法；

2）皂苷类化合物的鉴别方法及苷的酸水解方法。

【学时】 8学时

【主要仪器设备及材料】

实验原料：穿山龙

实验试剂及实验仪器依据学生设计的实验准备。

验三 白藜芦醇的提取和鉴别

【实验目的】

培养学生查阅资料、自行设计实验的能力，最终目的培养学生创新思维和创新能力。

【实验内容】老师指导、学生自行设计、操作。

1、指导学生查阅认识芪类多酚类化合物的结构、性质及来源；

2、 指导学生掌握芪类多酚类化合物提取方法（有机溶剂提取法），引导学生通过查阅资料了解其他提取方法（酶法，超声萃取，超临界CO2萃取法等）。

3、指导学生查阅资料并设计出从虎杖中提取、精制及检识白藜芦醇的方法。

4、引导学生总结：

1）提取与精制芪类多酚类化合物的原理及方法；

2）多酚类化合物的鉴别方法。

【学时】 8学时

【主要仪器设备及材料】

实验原料：虎杖

实验试剂及实验仪器依据学生设计的实验准备。

四、实验教材及参考书

1、教材：

王翠玲、刘竹兰、刘建利编，《中药化学实验指导》，自编教材。

2、教学参考：

1）赵晔等，天然药物化学实验指导，自编讲义。

2）吴立军，天然药物化学实验指导，人民卫生出版社，2011出版。

3）、裴月湖，天然药物化学实验指导，人民卫生出版社，2011出版。