实验教学

课程名称

Course   Name

生物化学与分子生物学实验

Biochemistry and Molecular Biology Experiment

课程类型

Course   Type

专业基础实验课

开课院（系）

Course   Offering College (Department)

生命科学学院

负责人

Leader

王英娟

课程团队

Team   Members

李恒

课程编码

Course   Code

BI104

学分

Credits

2

学时安排

Period   Arrangement

36

授课对象

Audience

药学专业本科生

授课语言

Language   of Instruction

中文

先修课程

Prerequisite   Courses

无机化学、物理化学、有机化学、分析化学

课程简介

Course   Description

生物化学与分子生物学实验旨在训练学生基本的生化与分子生物实验方法和技术，熟练掌握常用生物大分子（蛋白质、核酸）的定性定量分析法，常规的生物分子提取分离纯化鉴定技术，酶学特性的基本表征等基础性研究常识，聚合酶链式反应的原理与应用，重组蛋白的诱导表达，培养学生开拓创新能力，实验设计能力，以及科学论文写作能力。

课程目标

Course   Objectives

1. 课程支撑专业培养目标及规格达成

生物化学与分子生物学在分子水平探讨生物体的分子结构与功能、物质代谢与调节、遗传信息传递等。它是目前自然科学中进展最迅速、最具活力的前沿领域之一。生物化学与分子生物学在现代药学学科发展中起了先导作用，使药学以化学模式为主体迅速转向以生物学和化学相结合的新模式。因此生物化学与分子生物学实验是药学类专业学生需要学好的专业基础实验课，为将来从事药物研究、开发、生产、质量控制等奠定基础。

2. 课程教学目标

1）学习和了解生物化学与分子生物学实验相关技术原理；

2）熟练掌握生物化学与分子生物学实验基本操作技能；

3）培养学生创新思维、团队协作、发现问题和解决问题的能力。

思政育人

Curriculum    Education

1.课程思政育人目标

培养学生科学、严谨的工作作风。

2.思政育人教学设计

（重点阐述课程思政元素融合切入点、教学系统设计、所采取的教学方法以及预期教学成效等，课程思政建设并非思政元素的“简单植入”和“生搬硬套”，应当在梳理课程知识体系基础上发掘课程内含或联系紧密的思政育人元素，注重整体设计和有机融入，采取符合学生认知特点的讲授方式，充分体现课程思政的高度、深度和热度，下述格式仅供参考。）

以知识点：“重组蛋白的诱导与表达”为例：

（1）思政切入点：突出个体的特点。

（2）教学方法：感受态细胞转化了重组质粒后，在IPTG的诱导下会表达特定的结构基因。

（3）预期成效：乳糖操纵子的诱导表达，提示我们在今后的学习生活中，既要懂得沉淀自己，又要敢于在特定场合用于表达和展现个体的风采。

教学内容

Teaching Content

（按照课程章节结构，详细阐述各章节主要内容以及教学重点和难点，充分反映课程的知识和技能要求，体现课程特点；对于实践教学环节如实验、实习、上机、研讨等，应具体说明实践的基本教学内容、教学要求等。）

实验一 实验基础操作规范

本实验重点难点：熟悉并了解生物化学实验基本知识

1.1 生物化学与分子生物学实验室规则

1.2 生物化学实验室安全与防护常识

1.3 化学药品的使用和储藏

1.4 实验误差与数据处理

1.5 实验记录与报告

1.6 实验室常用仪器的使用

实验二 不同蛋白质的定量测定方法比较

本实验重点难点：熟悉并了解生物化学实验基本知识

1.1 蛋白质的定量测定（一）——紫外（UV）吸收测定法

1.2 蛋白质的定量测定（二）——考马斯亮蓝染色法

实验三 蛋白质相对分子质量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法

本实验重点难点：学会SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法的原理；掌握用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量的操作技术。

1.1 实验原理

1.2 试剂和器材

1.3 操作方法

1.4 注意事项

1.5 思考题

实验四 核酸浓度测定——紫外吸收法

本实验重点难点：了解Eppendorf 蛋白质核酸分析仪的使用方法。

1.1 实验原理：利用核酸的紫外吸收性进行核酸的定量测定。

1.2 试剂和器材

1.3 操作方法

1.4 注意事项

1.5 思考题

实验五 乳酸脱氢酶活力测定

本实验重点难点：了解乳酸脱氢酶活性测定原理；掌握用比色法测定酶活性的方法。

1.1 实验原理

1.2 试剂和器材

1.3 操作方法

1.4 注意事项

1.5 思考题

实验六 维生素B₂的荧光测定法

本实验重点难点：掌握荧光法测定维生素B₂的原理和方法。

1.1 实验原理

1.2 试剂和器材

1.3 操作方法

1.4 注意事项

1.5 思考题

实验七 糖酵解中间产物的鉴定

本实验重点难点：掌握糖酵解中间产物的鉴定方法和原理。

1.1 实验原理：衍生化法（DNPH）测定糖代谢中间产物：如对D-3-磷酸甘油醛的测定等。

1.2 试剂和器材：带有紫外检测器的HPLC系统（若条件允许）。

1.3 操作方法

1.4 注意事项

1.5 思考题

实验八 质粒DNA限制性酶切及琼脂糖凝胶电泳分离鉴定

本实验重点难点：了解DNA的限制性内切酶酶切的基本原理；掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术。

1.1 实验原理

1.2 试剂和器材

1.3 操作方法

1.4 注意事项

1.5 思考题

实验九 PCR法验证重组子

本实验重点难点：PCR的原理；PCR各个步骤的作用；引物设计；PCR程序的设置。

1.1 实验原理

1.2 试剂和器材

1.3 操作方法

1.4 注意事项

1.5 思考题

实验十 目的片段在原核细胞中的诱导表达

本实验重点难点：乳糖操纵子的诱导表达原理；诱导表达条件的摸索。

1.1 实验原理：操纵子原理。

1.2 试剂和器材

1.3 操作方法

1.4 注意事项

1.5 思考题

教学进度及要求

Teaching Progress and Requirements

内容

课内学时

教学方式

相关要求

实验基础操作 规范

1

实验操作

实验报告

不同蛋白质的 定量测定方法 比较（基础实验）

3

实验操作

实验报告

蛋白质相对分子量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（技术实验）

4

实验操作

实验报告

核酸浓度测定—紫外吸收法

2

实验操作

实验报告

乳酸脱氢酶活力测定（基础实验）

4

实验操作

实验报告

维生素B₂的荧光测定法（基础实验）

4

实验操作

实验报告

糖酵解中间产物的鉴定

4

实验操作

实验报告

质粒DNA限制性酶切及琼脂糖凝胶电泳分离鉴定（技术实验）

4

实验操作

实验报告

PCR法验证重组子

4

实验操作

实验报告

目的片段在原核细胞中的诱导表达（综合实验）

6

实验操作

实验报告

考核内容及方式

Contents   and Method of Assessment

考核环节

总成绩占比

实验操作

1、考勤。

2、实验操作。

45%

实验报告

报告完成情况

45%

课堂表现

如运用所学知识分析问题、解决问题的能力。

10%

教材

Teaching   Material

作者、译者

书名

出版社

出版时间

丛峰松

《生物化学实验》

上海交通大学出版社

2012年11月

参考书目

Bibliography

作者、译者

书名

出版社

出版时间

张嵘

《生物化学与分子生物学实验》

中国医药科技出版社

2019年3月

其它

More

/

备注

Notes

/

大纲执笔人

Author

王英娟、李恒

审核人

Reviewer

关锋